一、免疫细胞技术

        早期研究显示，随着年龄的增长，衰老的T细胞在脾脏聚积，引起免疫衰退。

        动物实验证实，和对照组相比，接受老年鼠的脾脏细胞后，年轻鼠出现生存期缩短。另一个实验显示，自身或者异体匹配的年轻的T细胞输入到脾脏切除的老年鼠体内，可以明显延长生存时间。

        因此，有人设想将一个人青春期的免疫活性细胞低温贮存，至其年老时再予输回，修复衰退的免疫功能和延长生命。

1、NK细胞

        NK细胞是机体重要的免疫细胞，功能是清除癌变细胞、衰老细胞以及体内不正常细胞。NK细胞来源于造血干细胞，在骨髓内发育成熟。在外周血中占淋巴细胞总数的10%-15%，脾内有3%~4%，也可出现在肺脏、肝脏和肠黏膜，但在胸腺、淋巴结和胸导管中罕见。

        NK细胞的作用是通过释放颗粒酶和激活死亡受体杀伤靶细胞。NK细胞与衰老细胞表面的受体结合，释放穿孔素、颗粒酶和细胞因子，诱导细胞凋亡信号的产生，促使衰老/病变细胞走向凋亡，恢复体内微环境的平衡，减轻炎症状态。

        同时，刺激和恢复机体新生细胞的产生，提高细胞活性，改善细胞质量，防止和延缓细胞的病变，恢复细胞、器官和免疫系统的功能，从而达到疾病预防、康复以及对抗衰老的目的。

        例如，肝脏损伤后激活肝星形细胞，但是衰老的肝星形细胞的持续存在是造成肝纤维化的主要原因。部分研究表明，激活的NK细胞可起到抗肝纤维化的作用，其机制是：

①产生IFN-γ。NK细胞是IFN-γ的主要制造者，而IFN-γ可抑制纤维化并引起肝星形细胞的凋亡及细胞周期停滞；

②通过与NK细胞上的NKG2D受体结合，直接杀伤活化的肝星形细胞；

③活化的NK细胞可通过增强NKG2D及TRAIL的表达来产生IFN-γ，放大其细胞毒作用。

2、免疫细胞技术在肿瘤治疗中的应用

 (1)肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)：TIL是最早的ACT回输细胞，将TIL从肿瘤细胞中分离出来，在体外用IL-2扩增，再系统回输给淋巴细胞清除的进展期黑色素瘤患者。

(2)树突状细胞(DCs)：DCs是获得性免疫反应的主要成分，T细胞介导的肿瘤免疫主要依赖于特异性的DCs提呈肿瘤抗原，从而激活杀伤性T细胞。

(3)细胞毒性T细胞(CTL)：CTL的MHC-I上有肿瘤来源的多肽，能够“锁定”并激活和它结合的T细胞受体(TCR)，让T细胞增殖并产生抗肿瘤的特性。

(4)自然杀伤细胞(NK)：临床上异基因造血干细胞移植后，应用供体NK细胞治疗血液肿瘤，增加造血干细胞植入，降低移植物排斥反应，增强抗白血病作用。

(5)细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)：CIK通过释放穿孔素及颗粒酶而直接杀伤肿瘤细胞，或通过分泌多种细胞因子而间接杀伤肿瘤细胞，还能通过激活凋亡基因诱导肿瘤细胞凋亡。CIK疗法应用于清除残余癌细胞，预防复发和转移，降低放化疗的毒副作用。

(6)T细胞受体(TCR)技术：TCR的作用机制是向普通T细胞中引入新的基因，使得新的T细胞能够表达TCR从而有效地识别肿瘤细胞，引导T细胞杀死肿瘤细胞。TCR技术受限于分离肿瘤特异性的抗原肽。在肝癌、乳腺癌、卵巢癌等治疗中取得一定成效。

(7)嵌合抗原受体(CAR)技术：CAR识别肿瘤抗原具有非MHC限制的特点，不需要进行抗原加工和呈递。只有少数的肿瘤特异性靶点能够被识别，且嵌合抗体具有潜在的免疫原性。

CAR-T细胞与癌细胞搏斗

(1)PD-1和PD-L1单抗：PD-1作为负性调控点，在体内与特异性配体(PD-L1、PD-L2)结合起作用，下调抗原刺激的淋巴细胞增殖、细胞因子的产生和生存蛋白的表达，最终导致淋巴细胞“耗尽”以及诱导免疫耐受的产生，同时上调免疫抑制细胞因子白细胞介素10的分泌，最终导致免疫逃逸，抑制T细胞的抗肿瘤作用。

(2)CTLA-4单抗：阻断CTLA-4的免疫效应可刺激免疫细胞大量增殖，从而诱导或增强抗肿瘤免疫反应。目前两种靶向CTLA-4的抗体已进入Ⅲ期临床试验，已广泛用于治疗黑色素瘤、肾癌、前列腺癌、肺癌等。

二、干细胞技术

        尚无有效药物证明能够延缓衰老，干细胞移植作为补充再生细胞的一种方法被广泛地用于治疗衰老相关性疾病，如骨髓衰竭、肌肉萎缩症、糖尿病、神经系统疾病和心血管疾病等。

1、间充质干细胞(MSCs)

        在以干细胞为基础的治疗中，MSCs被认为是“耕马”，MSCs在皮肤伤口修复中，促进顽固性溃疡愈合和烧伤创面疼痛减轻，无坏死组织形成，软组织重建。增加抑制性细胞数量，成功地用于治疗自身免疫性疾病，如类风湿关节炎、克罗恩病、系统性红斑狼疮和移植物抗宿主病等。应用脐带来源的MSCs恢复受损的卵巢功能和生殖能力。

2、诱导的多功能干细胞(iPs)

        成体细胞通过再编程的方式产生干细胞，作为干细胞的另一种来源，且同时修复基因缺陷，通过这种方法可以产生无限的免疫耐受干细胞用于移植。

3、自体干细胞的优化

        衰老从本质上影响干/祖细胞的特性，削弱了自体干细胞治疗的有效性。老年人是干细胞治疗的主要人群，需要使用经过特殊处理或筛选的自体干细胞用于移植，或者应用年轻供者的干细胞。

        研究发现，干细胞对化疗药物有很强的抵抗能力，免疫抑制剂、糖皮质激素、精神类药物和造影剂可能影响细胞活性和增殖能力。改善细胞培养环境、基因修饰、细胞因子预处理等均可以改善干细胞的功能。

4、干细胞微环境调节

        输注后的MSCs所处的微环境是非常重要的，涉及细胞间或细胞因子介导的复杂反应过程。最近研究表明，清除组织中的衰退细胞和其分泌的炎症因子能恢复干细胞的功能，然而在衰老末期清除衰退细胞仅仅能够延缓疾病进展，不能改善年龄相关的病理状态。